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2021-08-11
細(xì)胞凋亡（apoptosis）指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細(xì)胞自主的有序的死亡。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同，細(xì)胞凋亡不是一件被動的過程，而是主動過程，它涉及一系列基因的激活、表達(dá)以及調(diào)控等的作用，它并不是病理條件下，自體損傷的一種現(xiàn)象，而是為更好地適應(yīng)生存環(huán)境而主動爭取的一種死亡過程。下面介紹幾種常用的檢測細(xì)胞凋亡的方法。一、TUNEL法脫氧核糖核苷酸衍生物digoxin在TdT酶的作用下，可以摻入到凋亡細(xì)胞雙鏈或單鏈DNA的3-OH末端，與dATP形成異多聚體，并可與連接了...2021-08-11
細(xì)胞周期（cellcycle）是指細(xì)胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程，分為間期與分裂期兩個階段。間期又分為三期、即DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）與DNA合成后期（G2期）。細(xì)胞分裂期又稱M期。細(xì)胞通過M期一分為二，有的可繼續(xù)分裂進(jìn)行周期循環(huán)，有的轉(zhuǎn)入G0期。G0期是脫離細(xì)胞周期暫時停止分裂的一個階段。但在一定適宜刺激下，又可進(jìn)入周期（圖1），合成DNA與分裂。G0期的特點為：在未受刺激的G0細(xì)胞，DNA合成與細(xì)胞分裂的潛力仍然存在；當(dāng)G0細(xì)胞...2021-08-02
1、樣本準(zhǔn)備過程中防止蛋白質(zhì)降解和保留翻譯后修飾樣本準(zhǔn)備過程中，細(xì)胞會釋放蛋白酶和/或去磷酸化酶，為了減少這些酶的活性，處理樣本的過程應(yīng)在冰上進(jìn)行，并預(yù)先冷卻所有緩沖液，并且建議用含蛋白酶和磷酸酶抑制劑的裂解緩沖液。2、磷酸化特異性抗體的選擇選擇磷酸化特異性抗體時，選擇所要檢測位點的磷酸化抗體至關(guān)重要。磷酸化都會使蛋白質(zhì)的分子量增加80Da，檢查抗體是否檢測到磷酸化靶蛋白的分子量正確的條帶也很重要。3、誘導(dǎo)磷酸化課題設(shè)計可能需要在收獲前刺激細(xì)胞，以確保蛋白質(zhì)被磷酸化。例如，在...2021-08-02
蛋白轉(zhuǎn)印的方法蛋白轉(zhuǎn)印可選擇傳統(tǒng)濕轉(zhuǎn)、半干轉(zhuǎn)或快速半干轉(zhuǎn)方法。濕轉(zhuǎn)系統(tǒng)：適用于大多數(shù)各種分子量的常規(guī)蛋白轉(zhuǎn)印。轉(zhuǎn)印過程中凝膠和膜被浸入充滿轉(zhuǎn)印緩沖液的槽中。半干轉(zhuǎn)系統(tǒng)：凝膠和膜被夾在預(yù)先潤濕緩沖液的濾紙之間，濾紙與平板電極直接接觸。半干轉(zhuǎn)系統(tǒng)的安裝使用比濕轉(zhuǎn)簡單?？焖俎D(zhuǎn)印系統(tǒng)：快速轉(zhuǎn)印系統(tǒng)是最近發(fā)展出來的技術(shù)，使用專用設(shè)備、專用濾紙及專用緩沖液來快速有效地轉(zhuǎn)印蛋白。通常濾紙和濕潤的膜預(yù)先放在一次性包裝中，簡化了轉(zhuǎn)印“三明治”的組裝。轉(zhuǎn)印緩沖液轉(zhuǎn)印緩沖液包含強(qiáng)導(dǎo)電性化學(xué)緩沖試劑...2021-07-30
中山大學(xué)藥學(xué)院于7月27日發(fā)布通報，該院2021年7月27日發(fā)生一起實驗安全事故，實驗=室在清理通風(fēng)柜時發(fā)現(xiàn)之前畢業(yè)生遺留在燒瓶內(nèi)的未知白色固體，一博士研究生用水沖洗時發(fā)生炸裂，炸裂產(chǎn)生的玻璃碎片刺破該生手臂動脈血管，送醫(yī)救治傷情得到控制，無生命危險。與實驗室負(fù)責(zé)老師溝通分析，導(dǎo)致炸裂的未知白色固體中可能含有氫化鈉或氫化鈣，遇水發(fā)生劇烈反應(yīng)而炸裂。實驗室的瓶瓶罐罐清洗是科研工作者最日常的工作，但是，如果你并不確定瓶內(nèi)裝的是什么東西，千萬不要隨意就拿去清洗！有些化學(xué)品遇水會發(fā)生...2021-07-29
研究人員發(fā)現(xiàn)，盡管大腦通過中腦產(chǎn)生5-羥色胺的神經(jīng)元來調(diào)節(jié)快感和饑餓感的進(jìn)食，但每種進(jìn)食方式都是由自己獨立的電路連接的，不影響其他類型的進(jìn)食方式。美國疾病控制與預(yù)防中心(CentersforDiseaseControlａndPrevention)的數(shù)據(jù)顯示，無論是由饑餓還是愉悅引起的暴飲暴食，通常都會導(dǎo)致肥胖。美國約42%的成年人都患有肥胖癥。一個由貝勒醫(yī)學(xué)院(BaylorCollegeofMedicine)的研究人員領(lǐng)導(dǎo)的國際研究小組在動物模型上研究了大腦是如何調(diào)節(jié)饑餓或其...2021-07-29
基本原理：外源目的DNA與載體分子的連接稱為DNA重組，重組的DNA稱為重組體或重組子。研究中需要克隆或表達(dá)的基因為外源DNA，載體是指能夠攜帶外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞，并在其中進(jìn)行擴(kuò)增或誘導(dǎo)外源基因表達(dá)的工具，其中質(zhì)粒載體最為常用。質(zhì)粒是獨立于細(xì)菌染色體外具有自我復(fù)制的DNA分子。所有的質(zhì)粒都有復(fù)制子、選擇性標(biāo)志和多克隆位點3個共同的特性。質(zhì)粒載體的選擇包括載體的大小、載體拷貝數(shù)、多接頭以及篩選插入片段的能力，pcDNA3.1（+/-）是比較常用的真核表達(dá)載體。基本步驟：1、目...- 移液器
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